在肉瘤抗体抗体制疗域，淋巴腺神经细胞刺激启动DNA3（LAG3）成为继PD-1、CTLA-4后的其次大抗体抗体观察点，其基本的功能键控制长效机制长远悬而未决。傳統的研究受限制于存在间接预警读数和配体基本的功能键的争端，没法揭示LAG3怎么样去凭借配体根据触及可抑制性基本的功能键。

2025年3月18日上海科技大学王皞鹏课题组在Cell期刊（IF 45.5）上发表了题为“Ligand-induced ubiquitination unleashes LAG3 immune checkpoint function by hindering membrane sequestration of signaling motifs”的研究文章，利用泛素化突显组学与玄妙度球氨基酸组学的宽度结合，首届画制了LAG3刺激启动的动向突显图谱，揭示了其从“膜束缚”到“信号释放”的构象开关机制。这一突破不仅为免疫检查点研究提供了技术范式，更彰显了多组学联动的强大解析能力。

配体配合触及LAG3泛素化

为破解LAG3激活的分子开关，研究团队采用高灵巧度泛素化绘制组学技術，在T细胞-抗原呈递细胞（APC）共培养体系中捕捉关键修饰事件。通过免疫沉淀质谱（IP-MS）对LAG3胞内区深度覆盖，首次发现K498位点在配体激活后5分钟内发生快速泛素化（图1C）。突变实验证实，K498是唯一泛素化位点，且该修饰依赖配体结合（图1D-E）。值得注意的是，修饰组学定量分析显示，仅4%-7%的LAG3分子被修饰，揭示了“局部激活、全局调控”的时空特异性特征。研究还发现泛素化仅发生于膜结合型FGL1，可溶性FGL1因无法稳定锚定于APC膜表面而失效，揭示了配体功能的物理定位依赖性。

图1 配体融合诱导型LAG3的迅速的泛素化

（摘自：Jiang, et al., Cell, 2025）

非可降解性泛素化激活卡LAG3基本功能

传统观点认为受体泛素化多介导降解，但本研究通过对比野生型与泛素化缺陷型（LAG3KR）小鼠T细胞，发现泛素化不改变LAG3稳定性（图2A-C）。质谱鉴定显示其泛素链以K63连接为主（图2D-F），表明非降解性修饰特征。功能实验进一步证明，LAG3KR突变体丧失抑制IL-2分泌的能力（图2I），而强制暴露FSALE基序可恢复功能，蕴含了泛素化采用区域空间位阻破裂膜通过、解放能够抑制卫星信号的分子式语言表达。

图2 泛素化以不依靠血清水解反应的模式自动调节LAG3实用功能

（图源：Jiang, et al., Cell, 2025）

CBL宗族E3联接酶的多重调空

利用TurboID最靠近标签蛋白酶质组学技术设备（图3A），研究者筛选出c-Cbl和Cbl-b为LAG3泛素化的核心E3连接酶（图3B）。双敲除Jurkat细胞中，LAG3泛素化完全消失（图3D），抑制功能随之丧失（图3I）。尽管CBL介导的泛素化仅占其对T细胞抑制功能的10%，但其在肿瘤微环境中的特异性贡献仍为靶向治疗提供了新方向。

图3 Cbl-b和c-Cbl介导LAG3泛素化和抑止用途

（图源：Jiang, et al., Cell, 2025）

动物界绘图与医学被转化价值观

在MC38和B16黑色素瘤模型中，LAG3KR小鼠的肿瘤生长显著受限，PD-1联合治疗完全缓解率提升至50%。临床单细胞数据分析显示，LAG3/CBL共呈现高的病员T受损细胞哀竭符号TOX相关系数调涨（图4K），基于此开发的免疫组化检测方案使患者缓解率提升51.7倍（图4N），彰显蛋白质组学在转化医学中的潜力。

图4 LAG3泛素化为为癌症晚期免役缓解中的隐藏的生物技术logo物

（图源：Jiang, et al., Cell, 2025）

工作小结

本实验使用泛素化表达组学固定最新手机信号电开关、蛋清质组学解析视频E3进行连接酶机系统，机系统反映了LAG3激发的碳原子规律。这一个结果不仅能为天然免疫检测细胞捡查点机理实验提供数据了两组学资源共享的能力模版网站，而非靶点泛素化信号径路的抗癫痫制剂开拓及病人分块政策逐步形成了碳原子根本。今后，对于泛素化信号径路的抗癫痫制剂筛分或整改型表面抗原开拓，有希望超过目前有天然免疫检测细胞捡查点方式的出错短板，为精准扶贫肿癌天然免疫检测细胞制疗注射到新势能。

拜谱工作小结

拜谱生物，作为国内领先的多组学公司，可提供完善成熟的蛋白组学、代谢组学、转录组学等多组学产品技术服务。在修饰组学方面，拜谱生物拥有完备且成熟的产品体系，可提供磷碱化、泛素化等经典修饰组学产品，还有半胱氨酸氧化反应恢复品类遮盖（棕榈酰化、亚硝基化等）、乳过酸等特色修饰产品，近期又开发了衣康碱化、血清素化表达等新修饰组学产品，持续引领修饰组学发展。欢迎咨询！

参考使用专著：

Jiang Y, Dai A, Huang YW, Li H, Cui J, Yang HC, Si L, Jiao T, Ren ZX, Zhang ZW, Mou S, Zhu HR, Guo WH, Huang Q, Li YL, Xue MM, Jiang JW, Wang F, Li L, Zhong QY, Wang K, Liu BC, Wang JJ, Fan GF, Guo J, Chen L, Workman CJ., Shen ZR, Kong Y, Vignali DA, Xu CQ, Wang HP. Ligand-induced ubiquitination unleashes LAG3 immune checkpoint function by hindering membrane sequestration of signaling motifs. Cell. 2025. doi: 10.1016/j.cell.2025.02.014